Содержание

Стигмастерол — Stigmasterol — qaz.wiki

Стигмастерол
Имена
Название ИЮПАК

(3 S , 8 S , 9 S , 10 R , 13 R , 14 S , 17 R ) -17 — [( E , 2 R , 5 S ) -5-этил-6-метилгепт-3-ен-2- ил] -10,13-диметил-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-додекагидро- 1H -циклопента [ a ] фенантрен-3-ол

Другие имена

Стигмастерин; Фактор антижесткости Вульцена

Идентификаторы
3D модель ( JSmol )
ЧЭБИ
ЧЭМБЛ
ChemSpider
ECHA InfoCard 100,001,348
UNII
  • InChI = 1S / C29h58O / c1-7-21 (19 (2) 3) 9-8-20 (4) 25-12-13-26-24-11-10-22-18-23 (30) 14- 16-28 (22,5) 27 (24) 15-17-29 (25,26) 6 / ч 8-10,19-21,23-27,30H, 7,11-18h3,1-6h4 / b9- 8 + / t20-, 21-, 23 +, 24 +, 25-, 26 +, 27 +, 28 +, 29- / м1 / с1
     Y
    Ключ: HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N Y
  • InChI = 1 / C29h58O / c1-7-21 (19 (2) 3) 9-8-20 (4) 25-12-13-26-24-11-10-22-18-23 (30) 14- 16-28 (22,5) 27 (24) 15-17-29 (25,26) 6 / ч 8-10,19-21,23-27,30H, 7,11-18h3,1-6h4 / b9- 8 + / t20-, 21-, 23 +, 24 +, 25-, 26 +, 27 +, 28 +, 29- / м1 / с1

    Ключ: HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGBL

  • CCC (C = CC (C) C1CCC2C1 (CCC3C2CC = C4C3 (CCC (C4) O) C) C) C (C) C

Свойства
С 29 Н 48 О
Молярная масса 412,702  г · моль -1
Внешность Белое твердое вещество
Температура плавления От 160 до 164 ° C (от 320 до 327 ° F, от 433 до 437 K)
Нерастворимый
N проверить  ( что есть   ?) YN
Ссылки на инфобоксы

Стигмастерол — это растительный стерол ( фитостерин ) — является одним из наиболее распространенных растительных стеролов , имеющий основную функцию , чтобы сохранить структуру и физиологию из клеточных мембран . В Европейском Союзе это пищевая добавка, указанная под номером E E499 , и может использоваться в производстве пищевых продуктов для увеличения содержания фитостерина, потенциально снижая уровень холестерина ЛПНП .

Открытие

Стигмастерин, когда-то названный фактором Вульцена в середине 20 века , был открыт физиологом из Калифорнийского университета Розалинд Вулцен (род. 1886).

Природные явления

Стигмастерин представляет собой ненасыщенный фитостерин, содержащийся в растительных жирах или маслах многих растений, таких как соевые бобы , калабарная фасоль и семена рапса , а также в травах, используемых в практике траволечения , включая китайские травы Ophiopogon japonicus (Mai men dong), в Mirabilis jalapa .

Стигмастерин входит в состав различных овощей , бобовых , орехов , семян и непастеризованного молока . Пастеризация инактивирует стигмастерол. Пищевые масла содержат больше, чем овощи.

Использует

Стигмастерол — это пищевая добавка в производимые пищевые продукты в Соединенном Королевстве и Европейском Союзе.

Он был введен Перси Лавоном Джулианом в качестве предшественника для промышленного крупномасштабного производства полусинтетического прогестерона , ценного человеческого гормона, который играет важную физиологическую роль в механизмах регуляции и восстановления тканей, связанных с эффектами эстрогена , а также действует как промежуточное звено в организме человека. биосинтез андрогенов , эстрогенов и кортикоидов . Он также используется как предшественник витамина D 3 .

Компания Upjohn использовала стигмастерол в качестве исходного сырья для коммерческого синтеза кортизона в 1959 году.

Исследование

Как один из основных фитостеринов, стигмастерин входит в состав стериновых соединений в рационе, потенциально способных снизить риск сердечно-сосудистых заболеваний. Потребление 2 граммов растительных стеролов в день связано со снижением холестерина ЛПНП в крови на 8-10%, что, возможно, снижает риск сердечно-сосудистых заболеваний. Как фактор клеточных процессов растений, стигмастерин может играть роль в стрессовых реакциях растений, метаболизме и ферментах, участвующих в биосинтезе мембран растительных клеток.

Также было показано, что стигмастерин оказывает антиангиогенное и противораковое действие посредством подавления TNF-альфа и VEGFR-2.

Возможный предшественник болденона

Стигмастерин, как стероид, является предшественником анаболического стероида болденона . Болденона ундециленат обычно используется в ветеринарии для стимуляции роста крупного рогатого скота, но он также является одним из наиболее часто используемых анаболических стероидов в спорте. Это привело к подозрению, что некоторые спортсмены с положительным результатом теста на болденон не употребляли сам стероид, а употребляли продукты, богатые стигмастеролом; это оказалось не так.

Смотрите также

Ссылки

<img src=»https://en.wikipedia.org//en.wikipedia.org/wiki/Special:CentralAutoLogin/start?type=1×1″ alt=»» title=»»>

Большая Энциклопедия Нефти и Газа, статья, страница 1

Стигмастерин

Cтраница 1

Стигмастерин, содержащийся в соевом масле, и эргостерин — в дрожжах, используют для частичного синтеза стероидных гормонов.  [1]

Стигмастерин имеет в молекуле две двойные связи, одна из которых находится в боковой цепи. У ситостеринов известны несколько изомеров ( а, р и у) с температурой плавления 135 — 136, 139 — 140 и 143 — 144 С.  [2]

Стигмастерин дает оранжевую, а ситостерин — красную окраску. Эргостерин дает так называемую обратную реакцию Сальковского. Серная кислота, прибавленная к хлороформному раствору эргостерина, окрашивается в красный цвет, в то время как хлороформный слой остается бесцветным.  [3]

Стигмастерин был подвергнут гидрированию, и полученное ацетильное производное ста-нола ( VI) было окислено хромовой кислотой. Из окисленной смеси была выделена в незначительном количестве кислота VII, в которой ацетили-рованная гидроксильная группа и кольцевая система остались неизмененными, но от боковой цепи отщепился остаток с шестью атомами углерода.

 [4]

Стигмастерин ( стигмастерол, 24-этилхолестадиен — 5 22-ол — Зр) получают из соевого масла или воска сахарного тростника.  [5]

В стигмастерине имеется этильная группа при С21 и помимо обычной двойной связи ( Св — С6) — двойная связь в боковой цепи у С22 — Саз-Холестерин ( греч. Соединение это является характерным стерином высших животных и содержится во всех клетках животного организма, причем наибольшие его количества содержатся в мозговой и нервной ткани, в надпочечных железах и в яичном желтке. В твердом веществе: человеческого мозга содержится до 17 / этого соединения. В мозговой ткани и в желчных камнях холестерин находится почти исключительно в свободном состоянии, но в большинстве других органов животных он встречается частично в виде эфиров высших жирных кислот.  [6]

Тетрабромид ацетата стигмастерина ( четырех — и шестиугольные листочки) весьма мало растворим в метиловом и; гиловом спиртах и уксусной кислоте, трудно растворим в ацетоне и эфире, легко-в хлороформе.  [8]

Ситостерип представляет собой стигмастерин

, лишенный двойной связи в положении 22, 23; известны также его изомеры — а.  [9]

При этом холестерин, стигмастерин, [ 3-ситостерин и десмо-стерин продвигаются в виде одного пятна, но могут быть отделены от А7 — холестен — Зр-ола.  [11]

Среди других стеринов следует упомянуть стигмастерин, имеющий растительное происхождение ( калвбарские соевые бобы), а также выделенный из дрожжей эргостерин — предшественник витамина D. Холестерин открыт М. Э. Шеврелем в 1815 г. Как установлено в настоящее время, биосинтез холестерина проходит теми же основными путями, что и биосинтез тритерпенов ( см. с.  [12]

Определение кампестерина, р-ситосте-рина и стигмастерина методом газо-жидко-стной хроматографии.

НФ SE-30 на газхроме Z или диатопорте S; детектор пламенно-ионизационный.  [13]

Хотя в смеси стеринов содержится мало стигмастерина, его можно легко выделить из этой смеси в виде трудно растворимого ацетилтетрабромпроизводного. Близость стигмастерина к холестерину была впервые доказана дальнейшими работами, проведенными в геттингенской лаборатории и сыгравшими впоследствии большую роль при изучении стероидных гормонов.  [14]

Первый синтез прогестерона был осуществлен исходя из стигмастерина.  [15]

Страницы:      1    2    3    4

Россельхознадзор — Новости

С начала 2018 года в лабораторию в рамках плана выполнения государственных заданий было доставлено 15 проб молочной продукции для выявления фитостеринов растительного жира.

В одной пробе сыра «Российского» (ГОСТ 32260-2013, высший сорт), доставленного Управлением Россельхознадзора по Саратовской области, были  обнаружены фитостерины (кампестерин, стигмастерин, бета-ситостерин).

В животном молочном жире из стеринов присутствует только холестерин. Наличие других стеринов говорит о том, что жир не является натуральным животным жиром.

ФГБУ «Саратовская МВЛ» уже в течение нескольких лет успешно применяет на практике метод газовой хроматографии определения жирнокислотного состава для выявления фальсификации молочных продуктов. Этот метод основан на определении процентного содержания жирных кислот в продукте. Однако, производители, получившие протокол испытаний с неудовлетворительным результатом (в частности, о фальсификации жировой фазы жирами растительного происхождения), не соглашаются с результатами исследований, ссылаясь на то, что исследования проведены на соответствие только по одному критерию подлинности, без проведения испытаний на обнаружения фитостеринов растительных масел.

То есть считают заключение о фальсификации жировой фазы на основании жирнокислотного состава молочного жира не корректным.

В 2017 году специалистами отдела химический исследований был аккредитован и успешно внедрён в практику ГОСТ 33490-2015 «Обнаружение растительных масел и жиров на растительной основе методом газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием». Этот метод основан на предварительном гидролизе стероидов, содержащихся в жировой фазе молока и молочных продуктов, в стерины и последующее их разделение и обнаружение на газовом хроматографе Agilent 7890А с масс-селективным детектором. Метод обнаружения стеринов считается арбитражным и позволяет с высокой степенью точности и достоверности сделать заключение о фальсификации молочной продукции растительным жиром.

Поставка импортных реактивов — тендер №16648996

305 992,53 ₽

Обеспечение заявки

3 059,93

Обеспечение договора

3 059,93

Место поставки: г. Санкт-Петербург

Подача заявок завершена

Взять в работу

Мясо и мясные продукты.

Идентификация немясных ингредиентов растительного происхождения методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектором – РТС-тендер


ГОСТ 33608-2015



МКС 67.120.10

Дата введения 2017-01-01


Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт мясной промышленности имени В.М.Горбатова» (ФГБНУ «ВНИИМП им.В.М.Горбатова»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 октября 2015 г. N 81-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

Таджикистан

TJ

Таджикстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 марта 2016 г. N 214-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33608-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

1 Область применения


Настоящий стандарт распространяется на мясо, включая мясо птицы, субпродукты, мясные и мясосодержащие продукты и устанавливает метод газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектором (ГХ-МС) для идентификации (анализа) немясных ингредиентов растительного происхождения (наличия растительных жиров, ингредиентов, содержащих растительные жиры) по массовой доле фитостеринов (брассикастерин, кампестерин, стигмастерин, -ситостерин).

Диапазон измерений фитостеринов составляет от 1 до 1000 мг/кг.

2 Нормативные ссылки


В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79* Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
_______________
* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009 «Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».


ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4025-95 Мясорубки бытовые. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-2-2003* Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений
_______________
* В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».


ГОСТ ИСО 5725-6-2003* Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
_______________
* В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике»


ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 6995-77 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 7269-79 Мясо. Методы отбора образцов и органолептические методы определения свежести

ГОСТ 7702.2.0-95 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Методы отбора проб и подготовка к микробиологическим исследованиям

ГОСТ 9792-73 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 20469-95 Электромясорубки бытовые. Технические условия

ГОСТ 23042-86 Мясо и мясные продукты. Методы определения жира

ГОСТ 24363-80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26272-98 Часы электронно-механические кварцевые наручные и карманные. Общие технические требования

ГОСТ 26678-85 Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия

ГОСТ 28165-89 Приборы и аппараты лабораторные из стекла. Аквадистилляторы. Испарители. Установки ректификационные. Общие технические требования

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения


В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 стерины: Природные соединения растительного и животного происхождения, относящиеся к классу стероидов; в зависимости от источников получения, разделяют на фитостерины (брассикастерин, кампестерин, стигмастерин, -ситостерин), выделяемые из неомыляемой части липидов растений, и зоостерины из жировой ткани животных.

3.2 аналит: Вещество, определяемое в пробе объекта аналитического контроля.

4 Сущность метода


Метод основан на щелочном гидролизе пробы, экстракции фитостеринов диэтиловым эфиром и последующем ГХ-МС анализе. Массовую долю стеринов определяют по площади пика идентифицированных стеринов относительно градуировочной зависимости, полученной при анализе градуировочных растворов стеринов в аналогичных условиях.

5 Требования безопасности

5. 1 При подготовке и проведении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

5.2 Помещение, в котором проводятся измерения, должно быть оснащено приточно-вытяжной вентиляцией. Работу необходимо проводить, соблюдая правила личной гигиены и противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

5.3 При работе с электроприборами необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ 12.1.019.

6 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы


Газовый хроматограф, укомплектованный:

— масс-спектрометрическим детектором с ионизацией электронным ударом, позволяющий проводить измерения в диапазоне от 33 до 550 атомных единиц массы (а.е.м.), с разрешением по шкале масс не более 1,0 а.е.м. и чувствительностью в режиме ионизации электронным ударом: при инжекции в колонку 2 пг гексахлорбензола (сканирование в диапазоне от 45 до 359 а. е.м. за 1 с) отношение сигнал/шум на молекулярном ионе с 284 не менее 10/1;

— устройством для введения образца с делением потоков;

— капиллярной колонкой на основе 5%-фенил — 95%-диметилполисилоксана длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщиной пленки 0,25 мкм;

— записывающим устройством с компьютерным управлением и автоматической программой обработки хроматографических данных в соответствии с комплектацией хроматографа.

Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1 специального (I) класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,001 г.

Баня водяная лабораторная, имеющая диапазон температур от 20°С до 100°С с точностью поддержания температуры ±0,5°С.

Испаритель роторный по ГОСТ 28165.

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469.

Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 26678.

Часы электронно-механические по ГОСТ 26272.

Банки стеклянные вместимостью 250-500 см с крышкой.

Пипетки градуированные вместимостью 1 и 10 см по ГОСТ 29227 или дозаторы автоматические с переменным объемом дозирования от 1 до 10 см и относительной погрешностью дозирования не более ±1%.

Фильтр мембранный из политетрафторэтилена с диаметром пор 0,45 мкм.

Колбы круглодонные К-1-100-29/32 по ГОСТ 25336.

Колба мерная 2-50-2 по ГОСТ 1770.

Колба коническая Кн-1-100(1000)-24/29 ТС по ГОСТ 25336.

Воронка В-56(75)-80 ХС по ГОСТ 25336.

Воронки делительные ВД-1-250(500) ХС по ГОСТ 25336.

Флаконы — виалы хроматографические из темного стекла вместимостью 2,0 см.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Гелий газообразный (сжатый) высокой чистоты.

н-Гексан, х.ч.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х.ч.

Метанол-яд по ГОСТ 6995.

Эфир диэтиловый, ч.д.а.

Эфир петролейный, ч.д.а.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.

Брассикастерин с содержанием основного вещества не менее 97,0%.

Кампестерин с содержанием основного вещества не менее 96,0%.

Стигмастерин с содержанием основного вещества не менее 98,0%.

-ситостерин с содержанием основного вещества не менее 99,0%.

7 Отбор проб

7.1 Отбор проб по ГОСТ 9792, ГОСТ 7269, ГОСТ 7702.2.0.

7.2 Пробу измельчают, дважды пропуская через мясорубку с диаметром отверстий решетки 2-4 мм, и тщательно перемешивают.

7.3 Подготовленную пробу помещают в стеклянную банку вместимостью 250-500 см и закрывают крышкой.

Допускается хранить подготовленную пробу в замороженном состоянии без доступа кислорода при температуре не выше минус 18°С не более 7 сут.

8 Подготовка к испытанию

8.1 Приготовление растворов

8.1.1 Приготовление растворов стеринов массовой концентрации 0,5 мг/см

Взвешивают 25,0 мг индивидуального фитостерина (брассикастерина, кампестерина, стигмастерина, -ситостерина), переносят в мерную колбу вместимостью 50 см и доводят до метки метанолом.

Растворы хранят в холодильнике при температуре минус (18±2)°С в течение 1 мес.

8.1.2 Приготовление смеси градуировочных растворов стеринов

Для определения стеринов из индивидуальных растворов массовой концентрации 0,5 мг/см готовят смесь градуировочных растворов массовой концентрации 100 мкг/см (раствор 1), 50 мкг/см (раствор 2), 25 мкг/см (раствор 3), 10 мкг/см (раствор 4), 1 мкг/см (раствор 5).

Для приготовления раствора 1 градуированной пипеткой в мерную колбу вместимостью 50 см переносят соответственно по 10 см индивидуального раствора стерина и тщательно перемешивают.

Для приготовления градуировочного раствора 2 в хроматографическую виалу переносят 0,5 см градуировочного раствора 1 и 0,5 см метанола.

Для приготовления градуировочного раствора 3 в хроматографическую виалу переносят 0,5 см градуировочного раствора 2 и 0,5 см метанола.

Для приготовления градуировочного раствора 4 в хроматографическую виалу переносят 0,2 см градуировочного раствора 2 и 0,8 см метанола.

Для приготовления градуировочного раствора 5 в хроматографическую виалу переносят 0,1 см градуировочного раствора 4 и 0,9 см метанола.

Растворы хранят в холодильнике при температуре (4±2)°С в течение 7 сут.

8.1.3 Приготовление раствора гидроокиси калия молярной концентрации (KOH)=10,0 моль/дм

Взвешивают 56,0 г гидроокиси калия, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.

Готовый раствор хранят в конических колбах с притертыми пробками, при комнатной температуре не более месяца.

8.2 Подготовка пробы

8.2.1 Щелочной гидролиз пробы

Пробу продукта массой 5-10 г выделяют жир по ГОСТ 23042 гексаном или петролейным эфиром. Полученный жир помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 см и добавляют 10 см раствора гидроокиси калия (см. 8.1.3). Колбу соединяют с обратным холодильником, помеoают в водяную баню и нагревают при температуре (80±2)°С в течение 30 мин, периодически перемешивая содержимое колбы. После этого содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры.

8.2.2 Экстракция стеринов

В колбу приливают 40 см дистиллированной воды и 30 см диэтилового эфира, перемешивают, сливают в делительную воронку вместимостью 500 см и дают отстояться в течение 5 мин. После расслаивания нижний водно-спиртовой слой сливают в коническую колбу вместимостью 100 см, а верхний эфирный слой оставляют в делительной воронке. Переливают водно-спиртовой слой в другую делительную воронку, добавляют 30 см диэтилового эфира, встряхивают, отстаивают в течение 5 мин и после расслаивания верхний эфирный слой приливают к эфирному экстракту в первой делительной воронке.

Эфирный экстракт промывают дистиллированной водой, не взбалтывая, порциями по 50 см, отбрасывая нижний водный слой, повторяя данную процедуру трижды.

Промытый эфирный экстракт фильтруют в круглодонную колбу вместимостью 100 см через складчатый фильтр со слоем безводного сернокислого натрия (10-15 г), помещенный в коническую воронку. Эфир отгоняют на роторном испарителе при температуре не выше 30°С под вакуумом.

Сухой остаток растворяют в 0,5 см метанола, пропускают через мембранный фильтр и переносят в виалу из темного стекла вместимостью 2 см для проведения измерения.

9 Проведение измерений

9.1 Хроматографические условия измерений

Газовый хроматограф с масс-спектрометрическим детектором включают в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации и устанавливают параметры, рекомендуемые изготовителем капиллярных колонок. Например, для капиллярной колонки 30 м0,25 мм0,25 мкм применяют следующие хроматографические условия*:
_______________
* В настоящем стандарте используется газовый хроматограф Agilent 7890 с масс-спектрометрическим детектором Agilent 5975С и хроматографической колонкой Agilent HP-5MS, 30 м, 0,25 мм, 0,25 мкм. Данная информация является рекомендуемой, приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не исключает возможность использования других средств измерений с аналогичными характеристиками.


— газ-носитель — гелий;

— скорость потока газа-носителя 1 см/мин;

— температура инжектора 250°С;

— инжектор в режиме без деления потока;

— начальная температура термостата колонки 100°С в течение 2 мин;

— программируемый нагрев от 100°С до 290°С со скоростью 20°С/мин;

— изотерма при температуре 290°С до 25 мин;

— время анализа 25 мин;

— объем вводимой пробы от 1 до 5 мм.

Допускается использование других хроматографических условий, обеспечивающих разделение компонентов пробы.

9.2 Параметры настройки масс-спектрометрического детектора

Градуировку и настройку масс-спектрометрического детектора в режиме электронной ионизации и тандемной масс-спектрометрии проводят согласно инструкции по эксплуатации прибора.

Для идентификации стеринов применяют следующие параметры:

— температура источников ионов 230°С;

— температура квадруполя 150°С;

— энергия электронов 70 эВ;

— режим детектирования — сканирование полного масс-спектра (в диапазоне масс 33-550 а. е.м.).

9.3 Градуировка ГХ-МС системы

Приготовленные по 8.1.2 градуировочные растворы анализируют ГХ-МС в условиях, выбранных в соответствии с 9.1, 9.2. Проводят по три параллельных измерения для каждой концентрации градуировочных растворов. Полученные хроматограммы обрабатывают с использованием компьютерной системы обработки данных. Определяют абсолютное время удерживания стеринов. С использованием средств программного обеспечения хроматографа строят градуировочную зависимость площади пика стеринов от концентрации аналита в пробе.

Коэффициент линейной корреляции полученной градуировочной зависимости должен быть не менее 0,99. При невыполнении этого условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Проведение градуировки обязательно при замене хроматографической колонки, а также при систематическом получении неудовлетворительных результатов контроля, выполняемого по разделу 12.

9. 4 Контроль аналитической системы

Контроль выполняют с использованием приготовленных по 8.1.2 градуировочных растворов. Полученный результат анализа не должен отличаться от действительного значения концентрации определяемых веществ в градуировочном растворе более чем на 3%, относительное стандартное отклонение времени удерживания аналитов не более чем на 5%. В случае невыполнения указанного критерия градуировочной характеристики проводят новую градуировку.

Контроль аналитической системы осуществляется при условиях, указанных в 9.1, 9.2, перед началом проведения измерений, а также при смене хроматографической колонки, чистке блоков аналитического прибора и т.д.

9.5 Выполнение измерений

В виалы вместимостью 2 см вносят подготовленную пробу по 8.2 и проводят два измерения на системе ГХ-МС при условиях, указанных в 9.1 и 9.2.

Идентификацию индивидуальных стеринов осуществляют по абсолютным временам удерживания и относительной интенсивности основного и двух подтверждающих ионов. При этом в масс-спектре должны присутствовать все пики, имеющие в эталонном масс-спектре относительную интенсивность 10% и более, максимальное расхождение в значениях от этой величины не должно превышать 20%. Относительная интенсивность двух вспомогательных ионов в масс-спектрах определяемых стеринов не должна отличаться более чем на 20% от интенсивности этих же пиков в спектрах градуировочных растворов. Соотношение сигнал/шум для каждого из выбранных ионов не должно быть меньше 3:1.

По значению площади хроматографического пика с использованием установленной градуировочной характеристики и программы обработки данных находят массовую концентрацию стеринов в анализируемой пробе.

Вычисление массовой доли стеринов в анализируемой пробе экстракта проводят для каждого из двух параллельных определений.

10 Обработка результатов


В соответствие с данными, полученными при анализе градуировочных растворов, создают таблицу пиков с использованием программного обеспечения. Расчеты площади пика и массовой доли стеринов выполняются системой обработки данных в автоматическом режиме.

Массовую долю стеринов , мг/кг, вычисляют по формуле

, (1)


где — массовая концентрация индивидуального стерина в градуировочном растворе, мкг/см;

— площадь пика индивидуального стерина в анализируемой пробе, усл. ед.;

— объем раствора для растворения стеринов после пробоподготовки, см;

— площадь пика индивидуального стерина в градуировочном растворе, усл. ед.;

— масса анализируемой пробы, г.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, округленное до второго десятичного знака.

Если на хроматограмме присутствуют пики с временем удерживания, характерным для -ситостерина или других стеринов растительного происхождения (брассикастерина, кампестерина, стигмастерина), и масс-спектр соответствует параметрам идентификации, установленным в 9. 5, то это подтверждает наличие растительных жиров (ингредиентов, содержащих растительные жиры) в анализируемой пробе.

Примечание — Массовую долю стеринов выражают в мг/кг, что равнозначно получаемой по формуле (1) размерности мкг/г.

11 Метрологические характеристики

11.1 Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности 0,95 приведены в таблице 1.


Таблица 1

Аналит

Границы относительной погрешности , %

Предел повторяемости , мг/кг

Предел воспроизводимости, мг/кг

Брассикастерин

22

0,18

0,25

Кампестерин

20

0,15

0,20

Стигмастерин

23

0,17

0,20

-ситостерин

15

0,10

0,20

— среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, мг/кг.

— среднеарифметическое значение результатов двух измерений, выполненных в разных лабораториях, мг/кг.

11.2 Расхождение между результатами двух параллельных измерений, выполненных одним оператором при анализе одной и той же пробы с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) , значения которого приведены в таблице 1.

Условия приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, при доверительной вероятности 0,95, должны удовлетворять условию

, (2)


где и — результаты двух параллельных измерений, %;

— предел повторяемости, %.

11.3 Расхождение между результатами двух измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости , значения которого приведены в таблице 1.

Условия приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, при доверительной вероятности 0,95, должны удовлетворять условию

, (3)


где и — результаты двух определений, выполненных в разных лабораториях, %;

— предел воспроизводимости, %.

11.4 Границы относительной погрешности (), находящиеся с доверительной вероятностью 0,95, при соблюдении условий настоящего стандарта, не должны превышать значений, приведенных в таблице 1.

12 Контроль точности результатов измерений

12.1 Процедуру контроля стабильности показателей качества результатов измерений (повторяемости, промежуточной прецизионности и погрешности) проводят в соответствии с порядком, установленным в лаборатории, по ГОСТ ИСО 5725-6.

12.2 Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости), осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-2. Расхождение между результатами измерений не должно превышать предела повторяемости (). Значения приведены в таблице 1.

12.3 Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-2. Расхождение между результатами измерений, полученными двумя лабораториями, не должно превышать предела воспроизводимости (). Значения приведены в таблице 1.

УДК 637.5.04/.07:006.354

МКС 67.120.10

Ключевые слова: мясо, мясные продукты, немясные ингредиенты растительного происхождения, стерины, фитостерины, брассикастерин, кампестерин, стигмастерин, -ситостерин, газовая хроматография с масс-спектрометрическим детектором




Электронный текст документа
подготовлен АО «Кодекс» и сверен по:
официальное издание
М.: Стандартинформ, 2016

ГОСТ 34456-2018 Молоко и продукция молочная. Определение состава стеринов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ГОСТ от 04 сентября 2018 года №34456-2018


ГОСТ 34456-2018



МКС 67.100.01

Дата введения 2019-07-01

Предисловие


Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1. 0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным автономным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности» (ФГАНУ «ВНИМИ»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 августа 2018 г. N 111-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

Узбекистан

UZ

Узстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 4 сентября 2018 г. N 561-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34456-2018 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2019 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

1 Область применения


Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочную продукцию и устанавливает метод определения состава стеринов с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии.

2 Нормативные ссылки


В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты*

________________

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009 «Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».


ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12. 4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ ISO 707-2013 Молоко и молочные продукты. Руководство по отбору проб**

________________

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 707-2010 «Молоко и молочные продукты. Руководство по отбору проб».


ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ ИСО 5725-1-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения***

________________

*** В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».


ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 13928-84 Молоко и сливки заготовляемые. Правила приемки, методы отбора проб и подготовка их к анализу

ГОСТ 24363-80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809.1-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты

ГОСТ 26809.2-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 2. Масло из коровьего молока, спреды, сыры и сырные продукты, плавленые сыры и плавленые сырные продукты

ГОСТ 27752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-будильники. Общие технические условия

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения


В настоящем стандарте применены термины с соответствующими определениями:

3. 1 стерины (стеролы): Высокомолекулярные полициклические природные спирты, относящиеся к группе стероидов, в основе структуры которых лежит насыщенный тетрациклический углеводород стеран.

3.2 фитостерины (фитостеролы, растительные стерины/стеролы): Высокомолекулярные полициклические природные спирты, относящиеся к группе стероидов, в основе структуры которых лежит насыщенный тетрациклический углеводород стеран, естественным образом присутствующие только в растениях (-ситостерин, брассикастерин, кампестерин, стигмастерин).

3.3 абсолютное время удерживания: Отрезок времени, проходящий с момента ввода вещества в колонку хроматографа до появления максимума пика вещества на хроматограмме.

4 Сущность метода


Метод основан на проведении реакции омыления жировой фракции посредством метанольного раствора гидроокиси калия с последующей экстракцией смесью диэтилового эфира и гексана, разделением методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии и сравнением полученных хроматограмм стеринов со временем удерживания стандартных веществ.

5 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и реактивы


Хроматограф жидкостной, включающий следующие элементы:

— инжектор;

— термостат с программированием температуры, обеспечивающий нагрев колонки до температуры (30±2)°C;

— колонку хроматографическую с фазой С18 и типоразмером 4,6х250 мм, 5 мкм;

— детектор спектрофотометрический;

— программное обеспечение для обработки данных.

Весы по ГОСТ OIML R 76-1 с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±1 мг.

Микрошприц вместимостью 0,020 см.

Термометр жидкостный (не ртутный) диапазоном измерения от 0°C до 100°C, ценой деления шкалы 1°C по ГОСТ 28498.

Часы 2-го класса точности по ГОСТ 27752.

Баня водяная термостатируемая.

Испаритель ротационный, с водяной баней, обеспечивающей поддержание температуры от 30°C до 100°C с погрешностью ±2°C.

Колба мерная 1-100-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-1-1-1, 1-1-1-5 по ГОСТ 29227.

Цилиндры 1(3)-100-2, 1(3)-250-2 по ГОСТ 1770.

Воронка делительная ВД-1-250 ХС по ГОСТ 25336.

Колба Кн-1-250-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-150, В-1-250 ТС по ГОСТ 25336.

Холодильник ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.

Бумага лакмусовая голубая.

Ацетонитрил, х.ч. для хроматографии.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х.ч., раствор в метаноле молярной концентрации 2,0 моль/дм.

н-гексан, х.ч. для хроматографии.

Метанол, х.ч.

Холестерин, содержание основного вещества не менее 95,0%.

-ситостерин, содержание основного вещества не менее 95,0%.

Брассикастерин, содержанием основного вещества не менее 95,0%.

Кампестерин, содержанием основного вещества не менее 96,0%.

Стигмастерин, содержанием основного вещества не менее 95,0%.

Эфир диэтиловый, х.ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающих необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

6 Отбор проб


Отбор и подготовка проб — по ГОСТ 13928, ГОСТ 26809.1, ГОСТ 26809.2, ГОСТ ISO 707.

7 Подготовка к проведению измерений

7.1 Приготовление растворов

7.1.1 Приготовление раствора калия гидроокиси в метаноле молярной концентрации 2,0 моль/дм

8 мерную колбу вместимостью 100 см помещают (11,200±0,001) г калия гидроокиси, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.2 Приготовление раствора холестерина в метаноле

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают (0,005±0,001) г холестерина, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.3 Приготовление раствора -ситостерина

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают (0,005±0,001) г -ситостерина, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.4 Приготовление раствора брассикастерина

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают (0,005±0,001) г брассикастерина, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.5 Приготовление раствора кампестерина

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают (0,005±0,001) г кампестерина, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.6 Приготовление раствора стигмастерина

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают (0,005±0,001) г стигмастерина, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 1 мес.

7.1.7 Приготовление рабочего раствора смеси стеринов

В мерную колбу вместимостью 10 см помещают по 1 см растворов стеринов по 7.1.2-7.1.6, добавляют небольшое количество метанола и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят метанолом до метки.

Срок хранения смеси стеринов при температуре (4±2)°C — не более 1 мес.

7.2 Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа к работе проводят в соответствии с прилагаемой к хроматографу инструкцией.

Условия хроматографирования.

Изократическое элюирование смесью подвижной фазы ацетонитрил/вода (95/5) (V/V) при скорости потока 1 см/мин, температура колонки 30°C. Объем вводимой пробы 0,020 см. Детектирование осуществляется при помощи спектрофотометрического детектора при длине волны 205 нм.

7.3 Подготовка пробы исследуемого продукта

Выделение стеринов из испытуемого продукта проводят методом омыления с последующей экстракцией.

7.3.1 Подготовка пробы молока и молочной продукции с массовой долей жира менее 40%

7.3.1.1 В круглодонную колбу вместимостью 250 см помещают (20,000±0,001) г пробы продукта и добавляют 100 см раствора гидроокиси калия в метаноле молярной концентрации 2,0 моль/дм.

7.3.1.2 К колбе подсоединяют обратный холодильник, кипятят на водяной бане в течение 30 мин и охлаждают.

7.3.1.3 Первое экстрагирование. После охлаждения раствор переливают в делительную воронку (N 1) вместимостью 250 см, добавляют 50,0 см смеси гексана и диэтилового эфира 1:1 (V/V). Раствор перемешивают, интенсивно встряхивая. После разделения смеси нижний слой сливают в стакан вместимостью 150 см. Верхний слой помещают в чистую делительную воронку (N 2) вместимостью 250 см.

7.3.1.4 Второе экстрагирование. Отобранный по 7.3.1.3 нижний слой помещают в делительную воронку (N 1), добавляют к нему 50 см смеси гексана и диэтилового эфира 1:1 (V/V). Раствор перемешивают, интенсивно встряхивая. После разделения смеси нижний слой сливают в стакан вместимостью 150 см. Верхний слой помещают в делительную воронку (N 2) с ранее отделенным верхним слоем, полученным после 1-го экстрагирования.

7.3.1.5 Третье экстрагирование. Отделившийся после 2-го экстрагирования нижний слой помещают в делительную воронку (N 1), добавляют к нему 50 см смеси гексана и диэтилового эфира 1:1 (V/V). Раствор перемешивают, интенсивно встряхивая. После разделения смеси нижний слой выливают (утилизируют). Верхний слой помещают в делительную воронку (N 2) с раствором, полученным после 1-го и 2-го экстрагирований.

7.3.1.6 Полученный раствор промывают дистиллированной водой порциями по 50 см, сливая нижний слой, до нейтральной реакции, определяемой с помощью лакмусовой бумаги.

Промытый экстракт переливают в круглодонную колбу вместимостью 250 см. Колбу подсоединяют к ротационному испарителю и упаривают экстракт досуха.

К полученному остатку добавляют 1 см метанола и аккуратно перемешивают. Полученный раствор используют для измерений.

7.3.2 Подготовка пробы молочной продукции с массовой долей жира более 40%

7.3.2.1 В круглодонную колбу вместимостью 250 см помещают (5,000±0,001) г пробы продукта и добавляют 50 см гидроокиси калия молярной концентрации 2,0 моль/дм.

7.3.2.2 Далее проводят процедуры по 7.3.1.2-7.3.1.6.

8 Условия проведения измерений


При выполнении измерений в лаборатории необходимо соблюдать следующие условия:

температура окружающего воздуха

(20±5)°C;

относительная влажность воздуха

(55±25)%;

атмосферное давление

(96±10) кПа.

9 Проведение измерений


Пробу анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-1 (подраздел 3.14).

Перед проведением серии анализов проводят разделение стандартов холестерина и фитостеринов с фиксацией времени удерживания каждого стерина.

Затем проводят хроматографический анализ смеси стеринов.

После этого проводят разделение анализируемой пробы.

10 Обработка результатов измерений


Идентификацию фитостеринов осуществляют по значению абсолютного времени удерживания. На хроматограмме данное значение отображается как расстояние от точки ввода пробы до выхода максимума пика вещества. Присутствие на хроматограмме пика с временем удерживания, характерным для фитостерина(ов), подтверждает наличие жиров растительного происхождения в анализируемой пробе продукта (рисунок 1).

Фитостерины считают обнаруженными, если время удерживания стерина на хроматограмме отличается от времени рабочего раствора на хроматограмме не более чем на 1%.

Не учитывают пики фитостеринов с соотношением сигнал/шум не более 3.

1 — холестерин; 2 — брассикастерин; 3 — кампестерин; 4 — стигмастерин; 5 — -ситостерин

Рисунок 1 — Хроматограмма смеси стандартов стеринов

11 Оформление результатов


Результат определения состава стеринов представляют в документах в виде наличия или отсутствия каждого стерина в отдельности, на основании чего делают заключение о фальсификации (нефальсификации) жировой фазы пробы продукта растительными маслами или жирами на растительной основе.

12 Требования, обеспечивающие безопасность

12.1 При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования:

— помещение лаборатории должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией в соответствии с ГОСТ 12.4. 021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных требованиями ГОСТ 12.1.005;

— требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007;

— требования техники безопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

13 Требования к оператору


Выполнение измерений может проводить специалист, имеющий специальное образование и освоивший метод в соответствии с требованиями настоящего стандарта.

УДК 637.147.2:543.06:006.354

МКС 67.100.01

Ключевые слова: молоко, продукция молочная, стерины, метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, холестерин, фитостерины, -ситостерин, брассикастерин, кампестерин, стигмастерин, термины и определения, сущность метода, отбор проб, подготовка к проведению измерений, проведение измерений, обработка результатов измерений, требования безопасности




Электронный текст документа
подготовлен АО «Кодекс» и сверен по:
официальное издание
М. : Стандартинформ, 2018

Исследование стеринов сливочного масла и спреда методом хромато-масс-спектрометрии Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

УДК 541.18.05/.052:547.67

ИССЛЕДОВАНИЕ СТЕРИНОВ СЛИВОЧНОГО МАСЛА И СПРЕДА МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ

© 2014 А. В. Карташева1, С. А. Ефанов2 , Е. В. Грехнева3, И. Б. Кометиани4

1 магистрант каф. химии e-mail: [email protected] Курский государственный университет

2 начальник экспертно-исследовательского отдела №1 e-mail: [email protected] филиал ЭКС ЦЭКТУ

3 канд. хим. наук, доцент каф. химии e-mail: [email protected] ru 4 канд. биол. наук, зав.каф. химии e-mail: [email protected] ru

Курский государственный университет

Приведен анализ литературных источников, составлена обобщенная схема, позволяющая наглядно представить примеры пробоподготовки, используемой для анализа стеринов методом газовой хроматографии. Сопоставлены два способа пробоподготовки и возможность их использования для анализа смеси жиров. Методом хромато-масс-спектрометрии в составе сливочного масла идентифицированы: холестерин, 7-

дегидрохолестерин, ланостерин; в составе спреда обнаружены: холестерин, Р-ситостерин, кампастерин, стигмастерин.

Ключевые слова: омыление, стерины, холестерин, 7-дегидрохолестерин, ланостерин, Р-ситостерин, кампастерин, стигмастерин, хромато-масс-спектрометрия.

Введение

Исследования стеринов в биологических объектах методом газовой

хроматографии довольно широко представлены в литературе и, как правило, отличаются длительной пробоподготовкой. Наиболее сложной задачей представляется выделение и очистка стеринов из природных жиров и масел по причине их относительно невысокого содержания. Анализ литературных данных позволяет составить схему, отражающую основные этапы и пути проведения подобных исследований.

Использование конкретного алгоритма во многом зависит от материальнотехнической базы, поставленных задач, желаемой количественной точности и пр.

Наиболее важным этапом во всей этой схеме является отделение стеринов от основной матрицы, главным образом представленной триглициридами жирных кислот. Классическим вариантом подготовки образца жира для исследования является омыление со спиртовым раствором щелочи [ГОСТ Р 51471-99; Чмиленко и др. 2009; Зиновьев 1952], в результате чего появляется возможность отделить неомыляемые вещества жира (стерины, высокомолекулярные спирты, углеводороды и пр.). В последнее время часто предпринимаются попытки упростить данный метод посредством использования твердофазной экстракции, позволяющей сэкономить время и реактивы [MV Russo 2005], а в ряде случаев используется даже прямое введение раствора жира (или после его встряхивания с раствором щелочи) в хроматограф [Alonso 1995: 11]. Последующие этапы используются для отделения фракции стеринов от других неомыляемых веществ [Toivo 1998].

ХИМИЧЕСКИЕ НАУКИ

Ж____________

Получение

дигитонидов

стеринов

________Ж________

Последовательное встряхивание с концентрированным раствором щелочи и водой

ГХ анализ

<-

Ж

ж

Получение триметилсилильных производных не является обязательным в случае качественного анализа, в то время как при количественном анализе это позволяет получить более правильные пики [Герег 1985].

Выбранный алгоритм для идентификации растительных стеринов в спредах должен обладать простотой и доступностью, но в то же время быть достаточно чувствительным. Для реализации этой задачи было решено использовать классическую пробоподготовку (омыление со щелочью) и ускоренную (встряхивание со щелочью) с последующим анализом методом капиллярной газовой хроматографии с масс-детектированием без получения триметилсилильных производных.

Экспериментальная часть

В качестве образцов для анализа с применением омыления были взяты растительно-сливочный спред с содержанием молочного жира 20,0% (образец №1), растительно-сливочный спред с содержанием молочного жира 19,5% (образец №2) и сливочное масло с содержанием жира 72,5% (образец №3), жирнокислотный состав которого не противоречил требованиям действующего стандарта [ГОСТ Р 52253-2004].

Auditorium: электронный научный журнал Курского государственного университета. 2014. № 3

Карташева А. В., Ефанов С. А., Грехнева Е. В., Кометиани И. Б.

Исследование стеринов сливочного масла и спреда методом хромато-масс-

спектрометрии

Извлечение неомыляемых веществ проводили при помощи щелочного гидролиза с использованием спиртового раствора гидроксида калия с концентрацией 1 моль/л. Для анализа брали навеску массой около 10 г. Получение достоверных результатов при отсутствии возможности сделать жирнокислотный состав или в случае его сомнительных результатов напрямую зависит от массы навески, взятой для анализа. Соответственно для анализа в этих случаях рекомендуется брать навеску образца массой 50 г [ГОСТ Р 51471-99].

В колбу для кипячения с навеской вносят «кипелки», 50 мл раствора щелочи и кипятят с обратным холодильником 1 час, охлаждают, добавляют 100 см3 дистиллированной воды и экстрагируют в делительной воронке неомыляемые вещества гексаном (трижды по 50 см3). Гексановый экстракт упаривают до 1 мл и вводят в газовый хроматограф Agilent 6850 c масс-селективным детектором Agilent 5975С в следующем режиме: колонка — кварцевая капиллярная НР — 5MS; начальная температура колонки 100 0С, подъем до 280 0С со скоростью 15 град/мин; выдержка 40 мин.; температура интерфейса — 290 0С; температура инжектора 290 0С; газ носитель — гелий; расход газа через колонку 1,0 мл/мин. Экстракт вводили в хроматограф в количестве 2 мкл с делением потока 1:20. Запись хроматограммы и регистрацию масс-спектров проводили в режиме по полному ионному току в диапазоне масс 50 — 450 атомных единиц.

Для исследования без омыления образец № 1 массой 0,3 г помещали в пробирку с пришлифованной пробкой. После полного растворения навески продукта в пробирку добавляли 5 мл спиртового раствора щелочи (2 н), встряхивали в течение 1 мин. Затем в пробирку добавляли 5 мл дистиллированной воды, встряхивали 10 сек. После разделения слоев верхний гексановый слой использовали для анализа. Хромато-масс-спектрометрическое исследование образца без предварительного омыления проводили в условиях, описанных выше, но с отсрочкой включения масс-детектора на 15 мин.

Обсуждение результатов

Исследование образца №1 показало, что последовательное встряхивание раствора жира в гексане со спиртовым раствором щелочи и водой позволит идентифицировать холестерин и ситостерин в смеси жиров. Однако, с учетом того что массовая доля молочного жира в образце № 1 составляет лишь 20%, достоверно идентифицировать ситостерин при более высоком содержании молочного жира путем пробоподготовки без омыления будет невозможно. Кроме того, использование таким образом подготовленной пробы отрицательно сказывается на работе хроматографа -малолетучие и тяжелые триглицериды не переводятся в легкие эфиры жирных кислот и оседают на частях прибора, требуя дополнительных мер его очистки.

Намного лучше оказались результаты после омыления проб даже без использования дополнительной очистки.

Исследование неомыляемых веществ методом хромато-масс-спектрометрии позволило выявить в составе образцов № 1 и 2 наряду с наличием холестерина (время выхода ~ 19,2 мин.), характерного для молочного жира, также присутствие кампастерина (время выхода ~ 21,4 мин.), стигмастерина (время выхода ~ 22,1 мин.), Р-ситостерина (время выхода ~ 23,5 мин.), характерных для растительных жиров (рис. 2, 3). Р-ситостерин, кампастерин и стигмастерин являются типичными представителями растительных стеринов [Тютюнников 1992]. В наибольшем количестве в растительных маслах встречается Р-ситостерин.

Исследование неомыляемых веществ образца № 3 наряду с наличием холестерина позволило выявить ланостерин (время выхода ~ 24 мин.) и 7-

ХИМИЧЕСКИЕ НАУКИ

дегидрохолестерин (время выхода ~ 20,1 мин.) (рис. 4). 7-дегидрохолестерин и ланостерин [Твердохлеб, Раманаускас 2006] являются составными звеньями цепочки по биосинтезу и дальнейшему преобразованию холестерина. Ланостерин является предшественником холестерина у животных (у растений циклоартенол), а 7-дегидрохолестерин при УФ облучении холестерина преобразуется в витамин D3 [П. де Майо 1963].

Рис. 1. Хроматограмма образца № 1(без омыления)

Auditorium: электронный научный журнал Курского государственного университета. 2014. № 3

Карташева А. В., Ефанов С. А., Грехнева Е. В., Кометиани И. Б. Исследование стеринов сливочного масла и спреда методом хромато-масс-

спектрометрии

Во всех образцах также обнаружен сквален (время выхода ~ 15,1 мин.), который является предшественником стеринов в живых организмах.

Визуальная разница соотношения высоты пиков холестерина и ситостерина при почти равном количестве молочного жира на хроматограммах образца № 1 и № 2 (рис. 2, 3) может быть вызвана разной природой масла или смеси масел,

использованных для производства заменителей молочного жира, входящих в состав этих образцов. Другой причиной этого может быть и разная степень рафинации, при которой происходит уменьшение количества стеринов [Phillips 2002].

Важно обратить также внимание на малую разницу во времени выхода ситостерина и ланостерина, что при отсутствии масс-детектора и стандарта ситостерина может привести к неверной интерпретации полученных результатов.

Таким образом, ускоренная пробоподготовка дает менее удовлетворительные результаты по сравнению с классическим подходом, заключающимся в омылении жира, и отрицательно влияет на работу оборудования. Омыление жира со спиртовым

ХИМИЧЕСКИЕ НАУКИ

раствором щелочи, дальнейшее концентрирование неомыляемых веществ и использование масс-детектора повышает достоверность полученных результатов.

Кроме того, масс-детектирование позволяет идентифицировать в молочном жире ланостерин, который может служить дополнительным идентификационным признаком животного жира.

Библиографический список

Alonso L, Lozada L, Fontecha J, Juarez M Determination of cholesterol in milk fat by gas chromatography with direct injection and sample saponification // Chromatographia. 1995. Vol. 41. No 1-2. P. 23-28.

Phillips K. M., Ruggio D. M., Toivo JI, Swank M. Free and esterified sterol composition of edible oils and fats // Journal of Food Composition and Analysis. 2002. No15. P.123-142.

Russo M.V., A De Leonardis, Macciola V. Solid phase extraction—Gas-chromatographic method to determine free cholesterol in animal fats // Journal of Food Composition and Analysis. 2005. No 18. P. 617-624.

Toivo J., Piironen V., Kalo P., Varo P. Gas chromatographic determination of major sterols in edible oils and fats using solid-phase extraction in sample preparation // Chromatographia. 1998. Vol. 48. N 11-12. P. 745-746.

ГОСТ Р 51471-99 «Жир молочный. Метод обнаружения растительных жиров газожидкостной хроматографией стеринов».

ГОСТ Р 52253-2004 «Масло и паста масляная из коровьего молока. Общие технические условия».

Герег Ш. Количественный анализ стероидов: пер. с англ. М.: Мир, 1985. 504 с.

Зиновьев А. А. Химия жиров. М.: Пищепромиздат, 1952. 119 с.

П. де Майо Терпеноиды / пер. с англ. под ред. В.Ф. Кучерова. М.: Изд. иностр. лит., 1963. 455 с.

Твердохлеб Г. В., Раманаускас Р. И. Химия и физика молока и молочных продуктов. М.: Де Ли принт, 2006. 360 с.

Тимофеева О. Н, Вашкевич. Е. В, Буневич. Н. В. Определение фитостеринов и холестерина в масложировой продукции методом капиллярной газожидкостной хроматографии [Электронный ресурс]. URL: http://

www.gendocs.ru>docs/7/6320/conv_5/file5.pdf (дата обращения: 12. 04.2014).

Тютюнников Б. Н., Бухштаб З. И., Гладкий Ф. Ф. и др Химия жиров. М.: Колос, 1992. 448 с.

Чмиленко Ф. А. Установление фальсификации молочной продукции методами газовой хроматографии / Ф. А. Чмиленко, Н.П. Минаева, А.В. Сандомирский, Л.П. Сидорова // Методы и объекты химического анализа. 2009. Т. 4. № 1. С. 60-66.

Auditorium: электронный научный журнал Курского государственного университета. 2014. № 3

High — основная документация RHEL 7 STIG

Описание

Использование слабых или непроверенных алгоритмов шифрования подрывает цели использования шифрования для защиты данных. В операционной системе должны быть реализованы криптографические модули, соответствующие более высоким стандартам, утвержденным федеральным правительством, поскольку это дает уверенность, что они были протестированы и утверждены.

Соответствует: SRG-OS-000033-GPOS-00014, SRG-OS-000185-GPOS-00079, SRG-OS-000396-GPOS-00176, SRG-OS-000405-GPOS-00184, SRG-OS-000478-GPOS -00223

Исправить

Настройте операционную систему для реализации одобренного Министерством обороны США шифрования, установив пакет dracut-fips.

Чтобы обеспечить строгое соответствие FIPS, необходимо добавить параметр ядра fips = 1 в командную строку ядра во время установки системы, чтобы генерация ключей выполнялась с использованием одобренных FIPS алгоритмов и непрерывного мониторинга тестов.

Настройте операционную систему для реализации одобренного Министерством обороны США шифрования, выполнив следующие действия:

Параметр ядра fips = 1 необходимо добавить в командную строку ядра во время установки системы, чтобы генерация ключей выполнялась с использованием утвержденных FIPS алгоритмов и непрерывных тестов мониторинга.Пользователи также должны убедиться, что система имеет достаточную энтропию во время процесса установки, перемещая мышь, или, если мышь недоступна, гарантируя, что набирается много нажатий клавиш. Рекомендуемое количество нажатий — 256 и более. Менее 256 нажатий клавиш могут создать неуникальный ключ.

Для правильной работы внутримодульной проверки целостности предварительная ссылка должна быть отключена. Это можно сделать, установив PRELINKING = no в конфигурационном файле «/ etc / sysconfig / prelink».Существующее предварительное связывание, если оно есть, должно быть отменено для всех системных файлов с помощью команды prelink -u -a.

Установите пакет dracut-fips с помощью следующей команды:

# yum install dracut-fips

Воссоздайте файл «initramfs» с помощью следующей команды:

Примечание. Эта команда перезапишет существующий файл «initramfs».

# дракуто -f

Измените командную строку текущего ядра в файле «grub.cfg», добавив следующую опцию в ключ GRUB_CMDLINE_LINUX в ​​файле «/ etc / default / grub», а затем пересоберите «grub.cfg ”файл:

фипса = 1

Изменения в «/ etc / default / grub» требуют перекомпоновки файла «grub.cfg» следующим образом:

На машинах с BIOS используйте следующую команду:

# grub2-mkconfig -o /boot/grub2/grub.cfg

На машинах с UEFI используйте следующую команду:

# grub2-mkconfig -o /boot/efi/EFI/redhat/grub. cfg

Если / boot или / boot / efi находятся в разных разделах, параметр ядра boot = <раздел / boot или / boot / efi> должен быть добавлен в командную строку ядра.Вы можете определить раздел, выполнив команду df / boot или df / boot / efi:

# df / boot Файловая система Используется 1K блоков Доступно Использование% Установлено на / dev / sda1 495844 53780 416464 12% / загрузка

Чтобы параметр конфигурации boot = работал даже в том случае, если имя устройства изменяется между загрузками, определите универсальный уникальный идентификатор (UUID) раздела с помощью следующей команды:

# blkid / dev / sda1 / dev / sda1: UUID = «05c000f1-a213-759e-c7a2-f11b7424c797» TYPE = «ext4»

Для приведенного выше примера добавьте в командную строку ядра следующую строку:

загрузка = UUID = 05c000f1-a213-759e-c7a2-f11b7424c797

Перезагрузите систему, чтобы изменения вступили в силу.

Чек

Убедитесь, что операционная система реализует одобренное Министерством обороны США шифрование для защиты конфиденциальности сеансов удаленного доступа.

Проверьте, установлен ли пакет «dracut-fips», с помощью следующей команды:

# установлен список yum | grep dracut-fips

драку-фипс-033-360.el7_2.x86_64.rpm

Если установлен пакет «dracut-fips», проверьте, настроена ли командная строка ядра для использования режима FIPS с помощью следующей команды:

Примечание: GRUB 2 считывает свою конфигурацию из файла «/ boot / grub2 / grub.cfg »на традиционных машинах с BIOS и из файла« /boot/efi/EFI/redhat/grub.cfg »на машинах с UEFI.

# grep fips /boot/grub2/grub.cfg /vmlinuz-3.8.0-0.40.el7.x86_64 root = / dev / mapper / rhel-root ro rd.md = 0 rd.dm = 0 rd.lvm.lv = rhel / swap crashkernel = auto rd.luks = 0 vconsole.keymap = us rd.lvm.lv = rhel / root rhgb fips = 1 тихий

Если командная строка ядра настроена на использование режима FIPS, проверьте, находится ли система в режиме FIPS, с помощью следующей команды:

# cat / proc / sys / crypto / fips_enabled 1

Если пакет «dracut-fips» не установлен, в командной строке ядра нет записи fips, или система имеет значение «0» для «fips_enabled» в «/ proc / sys / crypto», это открытие.

rndusr / stig: TUI и CLI для BitTorrent client Transmission

stig — это клиент TUI (текстовый пользовательский интерфейс) и CLI (интерфейс командной строки). для BitTorrent-клиента Transmission.

stig все еще находится в альфа-состоянии, что означает, что будут внесены критические изменения в новых выпусках без увеличения номера основной версии. Вы не должны примите ошибки; пожалуйста, сообщите о них.

Характеристики

  • Фильтры используются для выбора торрентов для листинга, запуска / остановки, удаление и т. д.
  • Вкладки позволяют открывать и переключаться между несколькими списками (торренты, одноранговые узлы, файлы и т. д.)
  • Команды делают почти все, и их можно вызывать
    • через одно- или многоклавишный (думаю, emacs) сочетания клавиш ,
    • , введя их в командной строке в TUI (думаю, vi) с вкладкой завершение ,
    • , предоставив их как аргументы CLI при вызове stig (думаю, git),
    • или перечислив их в файле rc , который загружается автоматически.
  • Цветовые темы поддерживают 16 и 256 цветов
  • Полная встроенная документация с командой help или --help аргументом
  • Полный уровень абстракции API позволяет добавлять поддержку других Клиенты BitTorrent с интерфейсами RPC (участники приветствуются)

Примеры

Добавьте два торрента, один по файлу и один по хешу, и выйдите из

 $ stig add / path / to / some.торрент d4d6b73851fe3288e40389a8e1fb98124a9b9ba5 

Подключитесь к хосту не по умолчанию и представьте TUI

 $ stig set connect.host torrents.local 

Распечатать все загружаемые и / или скачиваемые торренты на localhost: 9092 и выйти из

 $ stig set connect.port 9092 \; ls active 

Вывести список торрентов, содержащих более 50 раздач, а затем удалить их

 $ stig ls 'семена> 50'
$ stig rm 'семена> 50' 

Остановить / закачать торренты с / foo / в пути загрузки и соотношении выше 10

 $ stig stop 'path ~ / foo / & ratio> 10' 

Открыть две вкладки с разными списками торрентов:

  • медленно загружает торренты с / foo / в пути загрузки
  • небольших или хорошо заполненных торрента, отсортированных по размеру (по возрастанию) и количеству семена (по убыванию)
 $ stig tab ls 'path ~ / foo / & rate-up <10k' \; tab ls 'size <500M | семена> = 1k' --sort 'size,! seed' 

Конфигурация и сценарии

Вся конфигурация выполняется в файле rc, который представляет собой просто сценарий, содержащий список команд (подумайте о vim и. vimrc), которые выполняются во время запуска. Файл rc по умолчанию — $ XDG_CONFIG_HOME / stig / rc . XDG_CONFIG_HOME по умолчанию $ HOME / .config , если не установлен. Поскольку rc-файл по умолчанию пуст, он не создается автоматически, чтобы избежать беспорядка.

Дополнительные сведения см. В справке stig cfgman .

Пример RC-файла

 # Хост, на котором работает демон передачи
установить connect.host example.org
установить connect.port 123

# Обновлять списки torrent / peer / file / etc каждые 10 секунд
установить туи.опрос 10

# Столбцы по умолчанию в списках торрентов
установить столбцы. торренты название коэффициент повышение скорость понижение

# Открыть несколько вкладок при запуске
вкладка ls active --sort!% загружено, путь,! rate
tab ls paused --sort!% loaded - имя столбца,% загружено, соотношение, размер
tab ls isolated --sort tracker - имя столбца, путь
 

Запускать разные rc-файлы либо с stig -c path / to / file , либо с rc команда. Вы даже можете превратить их в исполняемые файлы с помощью shebang #! / Path / to / stig -Tc ( -T отключает TUI, -c указывает rc-файл).

Пример сценария обслуживания

 #! / Путь / к / stig -Tc
rm путь = / путь / к / торрентам / корзине
приостановить семена> 100
начальные семена <20 и размер> 10 г | семена <50 и размер> 20 г
 

Установка

Последний выпуск всегда находится на PyPI.

Пакеты

Pipx (рекомендуется)

Pipx устанавливает приложения в автономных виртуальных средах в $ HOME / .local / pipx / , который включает все зависимости. Исполняемые файлы sym-связана с $ HOME /.местный / bin / .

 $ pipx установить stig
Стиг обновления $ pipx
$ pipx удалить stig 

Пип

pip устанавливает приложения с их зависимостями в общесистемном ( / usr / local ) или пользовательская ( $ HOME / .local ) среда.

 $ pip3 install stig # Устанавливается в / usr / local /
$ pip3 install --user stig # Устанавливается в $ HOME / .local / 

Для обновления добавьте параметр --upgrade или -U .

Дополнительно

Для включения дополнительных функций доступны следующие дополнительные функции:

setproctitle
Удаление аргументов из заголовка процесса при работе в tmux session (для этого требуются заголовки Python; e.грамм. apt-get install libpython3-dev )
прокси
Туннелируйте подключение к демону передачи через SOCKS5, SOCKS4 или HTTP-прокси

Для установки stig с зависимостями за доплату:

 $ pipx install 'stig [setproctitle, proxy]' # Для версии pipx> = 0.15.0.0
$ pipx install stig --spec 'stig [setproctitle, proxy]' # Для версии pipx <0.15.0.0 

Версия для разработки

Для установки последней разрабатываемой версии stig с pipx:

 $ pipx install 'git + https: // github. com / rndusr / stig.git # egg = stig '# Для версии pipx> = 0.15.0.0
$ pipx install stig --spec 'git + https: //github.com/rndusr/stig.git#egg=stig' # Для версии pipx <0.15.0.0 

Разработка

Чтобы изменения кода вступили в силу немедленно, вы можете запустить python3 -m stig в каталоге проекта или используйте pip3 ’s - редактируемая опция .

Запуск тестов с помощью Python версии вашей системы

Чтобы запустить тесты с версией Python, установленной в вашей системе, просто запустите make test в каталоге проекта.Это создает виртуальный environment в ./venv , устанавливает stig и его зависимости туда и запускает все тесты.

Если вы хотите запускать тесты только для определенного модуля или пакета:

  1. Создайте виртуальную среду со всеми зависимостями: сделать venv
  2. Активируйте виртуальную среду: источник venv / bin / активировать
  3. Передайте любой путь в каталоге tests в pytest: тесты pytest / settings_test
Запуск тестов со всеми поддерживаемыми версиями Python
  1. Установите и настройте pyenv.
  2. С помощью pyenv установите поддерживаемые версии Python, перечисленные в .setup.py .
  3. В каталоге проектов stig создайте виртуальную среду со всеми зависимости: make venv
  4. Активируйте виртуальную среду: источник venv / bin / активировать
  5. Запустите тесты для каждой поддерживаемой версии Python: tox
  6. Передайте аргументы в pytest: tox - --exitfirst tests / settings_test

Требования

Содействие

Pull-запросы, отчеты об ошибках, запросы функций, идеи по улучшению и все такое. другие конструктивные вклады приветствуются.

Если вы хотите добавить код и застряли, не знаю, с чего даже начать, или просто чтобы убедиться, что вы не дублируете чьи-то усилия, откройте проблема.

Пожалуйста, отправьте свои собственные темы, если вы хотите, чтобы они были включены в стиг.

Лицензия

stig - бесплатное программное обеспечение: вы можете распространять и / или изменять его под условия Стандартной общественной лицензии GNU, опубликованной Бесплатным программным обеспечением Foundation, либо версии 3 Лицензии, либо (по вашему выбору) любой более поздней версии версия.

Эта программа распространяется в надежде, что она будет полезной, но БЕЗ ЛЮБАЯ ГАРАНТИЯ; даже без подразумеваемой гарантии ТОВАРНОЙ ЦЕННОСТИ или ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ КОНКРЕТНОЙ ЦЕЛИ. См. Стандартную общественную лицензию GNU для получения дополнительной информации. Детали.

9781846078088: Top Gear: Где Стиг? - AbeBooks

Таинственный Стиг, постоянный гонщик Top Gear и один из самых популярных членов команды TG , наконец-то получил собственную книгу.Но поклонникам придется немало потрудиться, чтобы найти его, поскольку он был искусно скрыт в серии блестяще прорисованных сцен. Его могли заметить с детьми на рок-фестивале; или наблюдение за его персоналом в его секретном подземном логове. Он мог быть одним из зрителей, проходящих вдоль маршрута Недели скорости в соляных равнинах в Бонневиле; или позагорать на Коста-дель-Стиг. Наполненный визуальными шутками и отсылками к сериалу, а также дополнительными благодарностями за то, что он заметил своих коллег по Top Gear, и несколько других скрытых жемчужин, Где Стиг? подарит поклонникам Top Gear часы веселья.

"синопсис" может принадлежать к другой редакции этого названия.

Об авторе :

Мэтт Мастер (Matt Master) - автор статей и тестировщик журнала Top Gear и автор книги Top Gear Midlife Crisis Cars . Род Хант - иллюстратор, клиентами которого являются BBC, журнал Economist , IKEA, Maxim и Syfy Channel.

Обзор :

«Где Стиг?» - подарит поклонникам Top Gear часы удовольствия."Ассоциация прессы

"

«Об этом заголовке» может принадлежать другой редакции этого заголовка.

Каковы медицинские применения Agrimonia Eupatoria?

Трава почек дракона (научное название: Agrimonia pilosa Ldb. ) Является многолетним травянистым растением из семейства розоцветных и травянистыми почками дракона. Корни в большинстве своем клубневые, корневища короткие, стебли могут достигать 120 см в высоту, листья периодически перистые сложные, черешки редко опушенные или опушенные; , Остро заостренный или тупо зубчатый по краям, редко опушенный, редко голый, прилистники травянистые, зеленые, серповидные, прилистники нижних стеблей иногда яйцевидно-ланцетные, соцветия шиповидные кисточки Ось соцветия волосистая, цветоножка волосистая; лопасти полосчатые, прицветники супротивные, яйцевидные, чашелистики треугольно-яйцевидные; лепестки желтые, нитевидные, рыльце головчатое.Плоды обратнояйцевидные, конусовидной формы, цветут и плодоносят с мая по декабрь.

Распространен во всех провинциях Северного и Южного Китая. Распространены как Центральная Европа, так и Россия, Монголия, Северная Корея, Япония и северный Вьетнам. Часто рождается у ручьев, обочин дорог, лугов, зарослей, опушек леса и под редкими лесами, на высоте 100-3800 метров. [3]
Производство производится во всех провинциях Северного и Южного Китая.Центральная Европа, а также Советский Союз, Монголия, Северная Корея, Япония и северный Вьетнам. [4]
Можно размножать семенами или разводить.
Основным вредителем является красный паук, который всасывает стебли и листья, в результате чего листья увядают и опадают, а растения погибают. Для профилактики и контроля можно выбрать фармакологические спреи, такие как кемит и бамат. [5]

Для травы бутонов дракона

Меридиан сексуального вкуса : Вкус горький, терпкий, плоский, возвращается в кишечник, желудок и селезенку; [7]
Показания к функциям : Лунья Цао обладает эффектами гемостаза, укрепления желудка, гладкой кишки, диареи и инсектицидов.Признаки утомляемости, утомляемости, нерегулярных менструаций, красных побочных выделений из влагалища, холода в желудке, красной и белой дизентерии, рвоты кровью, кровохарканья, кишечного ветра, гематурии, маточного кровотечения, дуоденального кровотечения и других симптомов. Целестин извлекает целестин в лекарство для крови.
Клиническое применение : По словам Чжао Тенг Чжаоянь (Япония), экстракт репейника (500 микрограммов / мл) показал очень значительную избирательную токсичность в отношении клеток рака шейки матки и нормальных клеточных культур, а степень ингибирования раковых клеток составила 100%. .Однако он на 100% способствует росту нормальных клеток человека. [6]

Здоровье травы почек дракона

Медицинские исследования показывают, что: Лунья Цао обладает сильным противораковым действием. Водорастворимые компоненты цельной травы оказывают сильное ингибирующее действие на саркому мыши S-180, рак легких Льюиса мыши LL-14 и меланому B-22, B-16. «Японский фармацевтический журнал» сообщил, что экстракт корня корневища оказывает сильное ингибирующее действие на аквамариновые раковые клетки и терапевтическое действие на водный рак мембраны Эрлиха.«Асахи Симбун» также сообщил, что Япония провела проверку почти тысячи натуральных лекарств и получила 3 ​​вида китайских лекарств с наивысшей активностью, одним из которых был отвар травы почек дракона, и в то же время он оказывал стимулирующее действие на рост. на 100 нормальных человеческих клетках. эффект. Что касается противораковой эффективности Лунья Цао, эксперты оценили следующее: «Традиционные химиотерапевтические препараты подобны палке о двух концах, которая убивает как раковые клетки, так и нормальные клетки. И, как Лунья Цао, оба убивают раковые клетки и полезны для нормальных клеток. , это редкость." [8]

Пищевая ценность травы лонджа

На каждые 100 г стеблей и листьев травы лонджа приходится 71 грамм воды, 11,2 мг каротина и 150 мг витамина С. Он также содержит белок, углеводы, минералы и другие питательные вещества.

Химический состав травы лонгья

Четыре соединения были выделены из 95% этанольного экстракта целого растения лекарственного растения Agrimonia pilosa Ledeb и были идентифицированы как stigmaster-5-ene-3 , 7-диол по физико-химическим свойствам и спектроскопии.(1), стигмастер-5-ен-37, -диол (2), стигмастер-36, -диол (3) и -ситостерин (4). Соединения 1-3 были впервые выделены из травы лонгья.
НА ДРУГИХ ЯЗЫКАХ

TUI и CLI для передачи BitTorrent-клиента

stig - это клиент TUI (текстовый пользовательский интерфейс) и CLI (интерфейс командной строки). для BitTorrent-клиента Transmission.

stig все еще находится в альфа-состоянии, что означает, что будут внесены критические изменения в новых выпусках без увеличения номера основной версии.Вы не должны примите ошибки; пожалуйста, сообщите о них.

Характеристики

  • Фильтры используются для выбора торрентов для листинга, запуска / остановки, удаление и т. д.
  • Вкладки позволяют открывать и переключаться между несколькими списками (торренты, одноранговые узлы, файлы и т. д.)
  • Команды делают почти все, и их можно вызывать
    • через одно- или многоклавишный (думаю, emacs) сочетания клавиш ,
    • , введя их в командной строке в TUI (думаю, vi) с вкладкой завершение ,
    • , предоставив их как аргументы CLI при вызове stig (думаю, git),
    • или перечислив их в файле rc , который загружается автоматически.
  • Цветовые темы поддерживают 16 и 256 цветов
  • Полная встроенная документация с командой help или --help аргументом
  • Полный уровень абстракции API позволяет добавлять поддержку других Клиенты BitTorrent с интерфейсами RPC (участники приветствуются)

Примеры

Добавьте два торрента, один по файлу и один по хешу, и выйдите из

 $ stig add / path / to / some.торрент d4d6b73851fe3288e40389a8e1fb98124a9b9ba5 

Подключитесь к хосту не по умолчанию и представьте TUI

 $ stig set connect.host torrents.local 

Распечатать все загружаемые и / или скачиваемые торренты на localhost: 9092 и выйти из

 $ stig set connect.port 9092 \; ls active 

Вывести список торрентов, содержащих более 50 раздач, а затем удалить их

 $ stig ls 'семена> 50'
$ stig rm 'семена> 50' 

Остановить / закачать торренты с / foo / в пути загрузки и соотношении выше 10

 $ stig stop 'path ~ / foo / & ratio> 10' 

Открыть две вкладки с разными списками торрентов:

  • медленно загружает торренты с / foo / в пути загрузки
  • небольших или хорошо заполненных торрента, отсортированных по размеру (по возрастанию) и количеству семена (по убыванию)
 $ stig tab ls 'path ~ / foo / & rate-up <10k' \; tab ls 'size <500M | семена> = 1k' --sort 'size,! seed' 

Конфигурация и сценарии

Вся конфигурация выполняется в файле rc, который представляет собой просто сценарий, содержащий список команд (подумайте о vim и. vimrc), которые выполняются во время запуска. Файл rc по умолчанию - $ XDG_CONFIG_HOME / stig / rc . XDG_CONFIG_HOME по умолчанию $ HOME / .config , если не установлен. Поскольку rc-файл по умолчанию пуст, он не создается автоматически, чтобы избежать беспорядка.

Дополнительные сведения см. В справке stig cfgman .

Пример RC-файла

 # Хост, на котором работает демон передачи
установить connect.host example.org
установить connect.port 123

# Обновлять списки torrent / peer / file / etc каждые 10 секунд
установить туи.опрос 10

# Столбцы по умолчанию в списках торрентов
установить столбцы. торренты название коэффициент повышение скорость понижение

# Открыть несколько вкладок при запуске
вкладка ls active --sort!% загружено, путь,! rate
tab ls paused --sort!% loaded - имя столбца,% загружено, соотношение, размер
tab ls isolated --sort tracker - имя столбца, путь
 

Запускать разные rc-файлы либо с stig -c path / to / file , либо с rc команда. Вы даже можете превратить их в исполняемые файлы с помощью shebang #! / Path / to / stig -Tc ( -T отключает TUI, -c указывает rc-файл).

Пример сценария обслуживания

 #! / Путь / к / stig -Tc
rm путь = / путь / к / торрентам / корзине
приостановить семена> 100
начальные семена <20 и размер> 10 г | семена <50 и размер> 20 г
 

Установка

Последний выпуск всегда находится на PyPI.

Пакеты

Pipx (рекомендуется)

Pipx устанавливает приложения в автономных виртуальных средах в $ HOME / .local / pipx / , который включает все зависимости. Исполняемые файлы sym-связана с $ HOME /.местный / bin / .

 $ pipx установить stig
Стиг обновления $ pipx
$ pipx удалить stig 

Пип

pip устанавливает приложения с их зависимостями в общесистемном ( / usr / local ) или пользовательская ( $ HOME / .local ) среда.

 $ pip3 install stig # Устанавливается в / usr / local /
$ pip3 install --user stig # Устанавливается в $ HOME / .local / 

Для обновления добавьте параметр --upgrade или -U .

Дополнительно

Для включения дополнительных функций доступны следующие дополнительные функции:

setproctitle
Удаление аргументов из заголовка процесса при работе в tmux session (для этого требуются заголовки Python; e.грамм. apt-get install libpython3-dev )

Для установки stig с зависимостями за доплату:

 $ pipx install 'stig [setproctitle]' # Для версии pipx> = 0.15.0.0
$ pipx install stig --spec 'stig [setproctitle]' # Для версии pipx <0.15.0.0 

Версия для разработки

Для установки последней разрабатываемой версии stig с pipx:

 $ pipx install 'git + https: //github.com/rndusr/stig.git#egg=stig' # Для версии pipx> = 0.15.0.0
$ pipx install stig --spec 'git + https: //github. com/rndusr/stig.git#egg=stig' # Для версии pipx <0.15.0.0 

Разработка

Чтобы изменения кода вступили в силу немедленно, вы можете запустить python3 -m stig в каталоге проекта или используйте pip3 ’s - редактируемая опция .

Запуск тестов с помощью Python версии вашей системы

Чтобы запустить тесты с версией Python, установленной в вашей системе, просто запустите make test в каталоге проекта.Это создает виртуальный environment в ./venv , устанавливает stig и его зависимости туда и запускает все тесты.

Если вы хотите запускать тесты только для определенного модуля или пакета:

  1. Создайте виртуальную среду со всеми зависимостями: сделать venv
  2. Активируйте виртуальную среду: источник venv / bin / активировать
  3. Передайте любой путь в каталоге tests в pytest: тесты pytest / settings_test
Запуск тестов со всеми поддерживаемыми версиями Python
  1. Установите и настройте pyenv.
  2. С помощью pyenv установите поддерживаемые версии Python, перечисленные в . Python-версия .
  3. В каталоге проектов stig создайте виртуальную среду со всеми зависимости: make venv
  4. Активируйте виртуальную среду: источник venv / bin / активировать
  5. Запустите тесты для каждой поддерживаемой версии Python: tox
  6. Передайте аргументы в pytest: tox - --exitfirst tests / settings_test

Требования

Содействие

Pull-запросы, отчеты об ошибках, запросы функций, идеи по улучшению и все такое. другие конструктивные вклады приветствуются.

Если вы хотите добавить код и застряли, не знаю, с чего даже начать, или просто чтобы убедиться, что вы не дублируете чьи-то усилия, откройте проблема.

Пожалуйста, отправьте свои собственные темы, если вы хотите, чтобы они были включены в стиг.

Лицензия

stig - бесплатное программное обеспечение: вы можете распространять и / или изменять его под условия Стандартной общественной лицензии GNU, опубликованной Бесплатным программным обеспечением Foundation, либо версии 3 Лицензии, либо (по вашему выбору) любой более поздней версии версия.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *